پاورپوینت بررسی آزمایشگاه بیو شیمی

در 119 اسلاید قابل ویرایش

کاربرد اسپکترو فتو متری در بیو شیمی
1 – اسپكتروفتومتری
بوسیله اسپكتروفتومتر شدت رنگ محلولها را با دقت اندازه گیری می كنند.
دستگاههائی كه برای رنگ سنجی به كار برده می شوند الكتروفتومترو یا اسپكتروفتومتر نامیده می شوند.
 شمای ساده زیر قسمتهای مختلف یك الكتروفتومتر را نشان می دهد.
بطور كلی هر اسپكتروفتومتر:
 
• یك منبع نورانی،
•یك وسیله ایجاد نور تكرنگ با طول موج مشخص
• یك سلول یا لوله مخصوص برای جادادن محلول رنگی
•، یك سلول فتوالكتریك و یك گالوانومتر دارد.
اندازه گیری غلظت یك محلول
به دو روش می توان غلظت یك محلول را اندازه گیری كرد:
الف) از راه اندازه گیری نوری كه از محلول رنگی خارج می شود و
به آن ،Transmitance   ،یا عبور می گویند؛
ب) اندازه گیری مقدار نوری كه جذب محلول رنگی می شود و به آن دانسیته اپتیك   (OPTICAL DENSITY) O.D یا آبسوربنس می گویند.
الف) دانسیته اپتیك یا آبسوربنس
نوری كه از یك محلول رنگی عبور می كند مقداری از آن جذب محلول رنگی می شود .
اگر Io شدت نور اولیه و I شدت نور خارج شده از محلول باشد بنابراین  I a شدت نوری است كه جذب محلول رنگی گردیده است.
نحوه درجه بندی دستگاه اسپکتروفوتومتر
روی صفحه مدرج دستگاه در قسمت بالا درصد نور عبور كرده یا ترانسمیتانس
در قسمت پائین درست در مقابل درجات ترانسمیتانس OD،یا ابز ربنس قرار می هند.
، درجات میزان عبور همه با هم مساوی است.
 درجات O D به علت لگاریتمی بودن نامساوی هستند.
واكنش رنگی قندها
مهمترین واكنش های رنگی قندها به قرار زیرند:
1 – واكنش مولیش (Molisch) : ?- نفتل + اسید سولفوریك غلیظ ؛
این واكنش برای تمام ساكاریدها مثبت است.
2 – واكنش بارفود (Barfoed) : استات مس در اسید استیك 1%؛
این واكنش مخصوص منوساكاریدهاست.
3 – واكنش بیال    (Bial)اورسینول در اسید كلریدریك + FeCl3  ؛
 به پنتوزها مانند گزیلوز جواب مثبت می دهد.